Komórki cytokeratynowe w szpiku kostnym i przeżycie pacjentów z rakiem piersi w stadium I, II lub III cd

Wszystkich 19 pacjentów z potwierdzonym zapalnym rakiem piersi (wszyscy z rakiem z węzłem dodatnim) otrzymało trzy cykle chemioterapii przed i po operacji, składające się z epirubicyny i cyklofosfamidu lub epirubicyny (90 mg na metr kwadratowy) i paklitakselu (175 mg na metr kwadratowy). Z 301 pacjentów z rakiem bez węzłów, 33 otrzymywało sam tamoksyfen, 23 otrzymywało więcej niż jeden czynnik, a 245 nie otrzymało żadnej ogólnoustrojowej terapii adiuwantowej. W czasie pierwotnej operacji wyjściowa diagnostyczna ocena odległych przerzutów obejmowała radiografię klatki piersiowej, mammografię przeciwstronnej piersi, ultrasonografię wątroby i skanowanie kości całego ciała. Badania te nie wykazały żadnych odległych przerzutów u żadnego z pacjentów. Po operacji pacjenci byli poddawani badaniom klinicznym co trzy miesiące i byli dalej badani tylko wtedy, gdy mieli objawy. Odnotowane tu wyniki zostały udokumentowane u wszystkich pacjentów od 16 sierpnia 1999 r.
Przygotowanie szpiku kostnego
Procedura przygotowania szpiku kostnego została opisana wcześniej.16 Krótko mówiąc, podczas gdy pacjent był pod znieczuleniem ogólnym, pobierano próbki szpiku kostnego z każdego górnego grzebienia biodrowego za pomocą aspiracji igłowej podczas pierwotnej operacji i przechowywano w probówkach traktowanych heparyną. Komórki jednojądrzaste oddzielono przez odwirowanie w gradiencie gęstości Ficoll-Hypaque (gęstość, 1,077 g na mol) przy 900 xg przez 30 minut, komórki przemyto i odwirowano przy 150 xg przez 5 minut, i milion komórek umieszczono na każdym szkiełko ślizga się16. Aspiraty dały od 4,0 × 106 do 6,6 × 107 komórek szpiku kostnego (średnia, 1,5 × 107).
Analiza immunocytochemiczna
Dla każdego pacjenta przebadaliśmy 2 x 106 komórek pod mikroskopem jasnego pola; identyczna liczba komórek służyła jako kontrola dla barwienia nieistotną immunoglobuliną. Nie używaliśmy cech morfologicznych do identyfikacji komórek; użyliśmy tylko barwienia immunocytochemicznego. Ponieważ nie było barwienia tła, nie było żadnych nieokreślonych wyników. Wszystkie slajdy zostały zbadane niezależnie przez dwóch obserwatorów, którzy zgodzili się na wyniki dla ponad 95 procent próbek. W przypadku rozbieżności wyników obaj badacze dokonali ponownej oceny slajdu i ostatecznie osiągnęli konsensus.
Zastosowaliśmy monoklonalne przeciwciało A45-B / B3 (Micromet, Monachium, Niemcy), które jest skierowane przeciwko pospolitemu epitopowi na polipeptydach cytokeratynowych, w tym heterodimerach cytokeratyny 8-18 i 8-19,23 w stężeniu od 1,0 do 2,0 .g na mililitr do wykrywania komórek nowotworowych w preparatach szpiku kostnego. Swoistość reakcji przeciwciał w próbkach szpiku kostnego została potwierdzona przez dodanie niezwiązanej immunoglobuliny mysiego szpiczaka w odpowiednim rozcieńczeniu. Linia komórkowa raka piersi BT-20 służyła jako kontrola pozytywna do immunoznaczania cytokeratyny.16 Reakcję pierwszorzędowego przeciwciała opracowano techniką fosfatazy alkalicznej fosfatazy alkalicznej w połączeniu z nową barwą fuksynową 24, aby wskazać wiązanie przeciwciała, jak opisano wcześniej. .16
Analiza statystyczna
Sprawdziliśmy wszystkie zgłoszone wyniki badań immunocytochemicznych i histopatologicznych oraz raporty z wydarzeń (śmierć, nawrót lub nawracające choroby) w trakcie obserwacji po ponownym sprawdzeniu oryginalnych plików danych
[hasła pokrewne: idiosynkrazja, odgłos opukowy stłumiony, błona odblaskowa ]
[przypisy: olx knurów, uj cm, patofizjologia cmuj ]