Uprawa Bacillus choroby Whipplea ad 7

Obecność przeciwciał IgM była bardziej specyficzna dla pacjentów z chorobą Whipple a. Gdy wybrano wartość graniczną 1:50, 7 z 9 pacjentów z chorobą Whipple a miało wyniki pozytywne w porównaniu z 3 z 40 osób kontrolnych (P <0,001). Obydwaj pacjenci z zapaleniem wsierdzia w chorobie Whipple a mieli pozytywne miano przeciwciał IgM, w porównaniu z żadnym z 10 pacjentów kontrolnych z zapaleniem wsierdzia z innych przyczyn (P = 0,015). Pięciu z 7 pacjentów z klasyczną chorobą Whipple a miało pozytywne miano przeciwciał IgM, w porównaniu z 2 z 10 pacjentów z chorobą autoimmunologiczną (P = 0,052). Miano przeciwciał IgM wynosiło 1: 400 lub więcej u trzech z siedmiu pacjentów z klasyczną chorobą Whipple a iu obu pacjentów z zapaleniem wsierdzia z chorobą Whipple a, ale u żadnego z pacjentów bez choroby Whipple a. Wyniki serologiczne dla jednego osobnika kontrolnego z chorobą autoimmunologiczną, u którego wykryto autoprzeciwciała przeciwko cytoplazmatycznym przeciwutrofilom były niemożliwe do interpretacji z powodu obecności immunofluorescencji rozproszonej. Przeciwciała wytworzono u myszy o wysokich mianach (1: 1000) i z powodzeniem stosowano do wykrywania bakterii w wyciętej tkance pacjenta za pomocą immunochemii.
Dyskusja
Chociaż chorobę Whipple a zidentyfikowano prawie sto lat temu, czynnik wywołujący tę bakteryjną infekcję nie został pomyślnie ustalony in vitro. Mimo że szczep bakterii nie jest dostępny, zwykle określa się go nazwą tymczasową, T. whippelii. 8,25 Identyfikacja molekularna tej bakterii w próbkach biopsyjnych lub próbkach krwi obwodowej jest podstawą diagnozy.9 Jednak ta technika musi zostać zatwierdzona, a rozpoznanie choroby Whipple a wymaga próbki biopsyjnej do badania mikroskopowego lub PCR analiza. Dlatego test serologiczny może być bardzo przydatny, ponieważ diagnozę można postawić na podstawie pojedynczej próbki krwi. Jest to szczególnie ważne u pacjentów z zagrażającymi życiu powikłaniami, takimi jak zapalenie wsierdzia.
W przeciwieństwie do poprzednich badaczy, którzy ukończyli tylko dwa kanały hodowli bakterii ludzkich makrofagów, 12 wykorzystaliśmy linię ludzkich komórek fibroblastów bez specyficznych warunków hodowli. Ukończyliśmy siedem pasaży naszego izolatu i wierzymy, że kultura jest już definitywnie ustalona. Do 285 dnia mieliśmy 120 silnie zainfekowanych kolb do hodowli komórkowej o powierzchni 150 cm2. Szczep został zdeponowany we Francuskiej Kolekcji Narodowej w Instytucie Pasteura w Paryżu i jest dostępny. Ponieważ potrzeba 210 dni na otrzymanie 25 dobrze zainfekowanych 150-cm2 kolb do hodowli komórkowych z fiolki z muszlą o wielkości cm2, czas generacji (lub czas podwojenia) bakterii wynosi około 18 dni, co jest podobne do tego dla Mycobacterium leprae w modelach zwierzęcych (12 dni) .26 Cierpliwość była kluczem do hodowania nowych patogenów, tak jak w przypadku gatunków bartonella 27, które mogą zająć nawet 45 dni w celu wyizolowania, oraz Helicobacter pylori, dla których przedłużona inkubacja jest również Niezbędne.28 Inną trudnością jest barwienie bakterii w komórkach. PAS jest użyteczny, ale nie wykrywa wszystkich bakterii, w przeciwieństwie do immunofluorescencji badanego szczepu. Najbardziej przydatna była plama z akrydyny. Jednak przeciwciała swoiste dla myszy mogą być bardzo użyteczne do tego celu.
Skuteczna izolacja bakterii wewnątrzkomórkowych częściowo opiera się na dwóch punktach krytycznych
[przypisy: odgłos opukowy stłumiony, szmer pęcherzykowy w płucach, falvit forum ]
[patrz też: badanie usg jamy brzusznej, farmacja cm uj, golemo gratka ]