Uprawa Bacillus choroby Whipplea

Choroba Whipple a jest ogólnoustrojową infekcją bakteryjną, ale do tej pory nie ustalono żadnego izolatu bakterii w subkulturze, a do badań nie było dostępnych szczepów tej bakterii. Metody
Korzystając z próbek pobranych z zastawki mitralnej pacjenta z zapaleniem wsierdzia z powodu choroby Whipple a, wyizolowaliśmy i namnożono bakterię przez zaszczepienie linii komórek ludzkich fibroblastów (HEL) za pomocą testu z muszlą-fiolą. Przetestowaliśmy próbki surowicy od naszego pacjenta, innych pacjentów z chorobą Whipple a i osób kontrolnych pod kątem obecności przeciwciał przeciwko tej bakterii.
Wyniki
Bakterię Whipple a z powodzeniem wyhodowano w komórkach HEL i ustaliliśmy subkultury izolatu. Pośrednie testy immunofluorescencyjne wykazały, że surowica pacjenta reagowała specyficznie z bakterią. Siedem z 9 próbek surowicy od pacjentów z chorobą Whipple a miało miano przeciwciał IgM wynoszące 1:50 lub więcej, w porównaniu z 3 z 40 próbek od osobników kontrolnych (P <0,001). Przeciwciała poliklonalne przeciwko bakterii wytworzono przez inokulację drobnoustroju myszom i stosowano do wykrywania bakterii w wyciętej tkance sercowej od naszego pacjenta w analizie immunohistochemicznej. Gen rybosomalnego RNA 16S hodowanej bakterii był identyczny z sekwencją Tropheryma whippelii zidentyfikowaną wcześniej w próbkach tkanek od pacjentów z chorobą Whipple a. Odmiana, którą wyhodowaliśmy jest dostępna w kolekcji francuskiej National.
Wnioski
Hodowaliśmy bakterię Whipple a, wykryliśmy specyficzne przeciwciała w tkance od pacjenta źródłowego i wygenerowaliśmy swoiste przeciwciała u myszy, które miały być użyte w immunodetekcji drobnoustroju w tkankach. Opracowanie testów serologicznych na chorobę Whipple a może być teraz możliwe.
Wprowadzenie
Choroba Whipple a jest ogólnoustrojową infekcją bakteryjną charakteryzującą się gorączką, utratą masy ciała, biegunką, powiększeniem węzłów chłonnych i zapaleniem wielostawowym oraz, czasami, objawami serca, takimi jak zapalenie mięśnia sercowego, zapalenie osierdzia i zapalenie wsierdzia1,2 lub zajęcie ośrodkowego układu nerwowego.3 George Whipple opisał chorobę w 1907,4 i jego bakteryjne pochodzenie potwierdzono za pomocą mikroskopu elektronowego w 1961 r.5. Rozpoznanie jest zwykle ustalane na podstawie mikroskopu przez identyfikację w próbce z dwunastnicy-biopsji naciekania przez duże makrofagi z bakteriami dodatnimi pod względem barwienia kwasami okresowymi-Schiff (PAS). 6 W 1991 Wilson i wsp. 7 zastosowali startery o szerokim zakresie w celu amplifikacji i sekwencjonowania części genu rybosomalnego RNA 16S bakterii w chorobie Whipple a, umożliwiając klasyfikację bakterii w kladzie Actinomycetes. Odkrycia te zostały potwierdzone i rozszerzone8. Od tego czasu doniesiono, że reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) jest przydatnym narzędziem do diagnozy choroby Whipple a.
Kultura bacillus była nieuchwytnym celem wielu pokoleń mikrobiologów.11 W 1997 roku bakteria została wyizolowana i wyhodowana w ludzkich makrofagach unieczynnionych przez interleukinę-4.12. Jednak tego izolatu nie można było przehodować, a obecnie nie jest dostępny izolat.13
Zgłaszamy pomyślne wyodrębnienie i ustalenie szczepu bakterii na chorobę Whipple a uzyskaną z zastawki mitralnej pacjenta z zapaleniem wsierdzia pochodzącym z niedoboru hodowli, generowanie swoistych przeciwciał przeciwko bakterii u myszy, wykrywanie bakterii w zastawka mitralna pacjenta poprzez immunochemię tymi przeciwciałami oraz wykrywanie swoistych przeciwciał przeciwko bakterii w surowicy pacjenta.
Metody
Pacjent indeksu
42-letni mężczyzna z upośledzeniem umysłowym spowodowanym zapaleniem mózgu u dziecka miał nastrój clubbingu i szmer sercowy jesienią 1997 r.
[przypisy: opukiwanie płuc, struna bebenkowa, neuryty ]
[przypisy: bataty wartości odżywcze, biopsja cienkoigłowa, olx jaslo ]